Ligature de l'ADN

Calculez la masse précise d’ADN d’insertion nécessaire pour un rapport molaire spécifique avec votre vecteur.

Paramètres de réaction

Masse vectorielle

Unit

Longueur du vecteur

Unit

Insérer la longueur

Unit

Rapport molaire (Insérer : Vecteur)

Insertion obligatoire

50.00ng

Masse d'insertion requise

Ratio3:1I:V

Total DNA100.0ng

Rapport par rapport à la masse de l'insert

Overview

La ligature relie deux fragments d'ADN : un vecteur (le squelette) et un insert (le gène d'intérêt). Équilibrer le nombre de molécules d’ADN (rapport molaire) est essentiel ; trop d'insert peut conduire à des concatémères, tandis que trop peu réduit le risque de collision entre extrémités compatibles.

💡

Pro Tips

Un rapport de 3 : 1 (Insert : Vecteur) est un point de départ standard pour la plupart des ligatures à extrémités collantes.
Les ligatures à extrémités franches bénéficient souvent de ratios plus élevés (par exemple 5 : 1 ou 10 : 1) et de temps d’incubation plus longs.
Les extrémités collantes (extrémités cohésives) ont des bases en surplomb qui assurent la spécificité et la stabilité pendant la réaction.
Veiller à ce que l'ADN soit de haute qualité ; les sels ou l'éthanol des kits de purification peuvent inhiber l'ADN ligase T4.
Incluez toujours un contrôle « Vecteur uniquement » (avec ligase) pour vérifier les antécédents d'auto-ligature.

Fun Facts

"L'ADN Ligase T4 est dérivée du bactériophage T4 et nécessite l'ATP comme cofacteur."
"L'ADN Ligase a été découverte en 1967 par plusieurs laboratoires presque simultanément."
"Dans votre corps, les ADN ligases travaillent constamment à réparer les cassures simple brin de votre génome."
"Gibson Assembly et Golden Gate Cloning sont des alternatives modernes qui utilisent différentes enzymes pour réaliser une ligature transparente."

Formula: Masse d'insertion = (Masse du vecteur × [Taille d'insertion / Taille du vecteur]) × Rapport

Used with this

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Calculez la vitesse de travail sur le terrain et la capacité du matériel agricole.

Fréquence allélique

Calculez les fréquences alléliques et génotypiques au sein d’une population à l’aide du modèle d’équilibre Hardy-Weinberg.

Calculateur de gestation d'alpaga

Estimez la date de criation (naissance) de vos alpagas et suivez la progression de la grossesse.

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Les extrémités collantes (extrémités cohésives) ont des bases en surplomb qui assurent la spécificité et la stabilité pendant la réaction.
Veiller à ce que l'ADN soit de haute qualité ; les sels ou l'éthanol des kits de purification peuvent inhiber l'ADN ligase T4.
Incluez toujours un contrôle « Vecteur uniquement » (avec ligase) pour vérifier les antécédents d'auto-ligature.

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