Concentrazione di proteine

Quantificare le proteine in soluzione utilizzando l'assorbanza spettrofotometrica (A280) o il metodo di correzione Warburg-Christian.

Spettrofotometria

Assorbanza a 280 nm

Fattore di diluizione

Coeff di estinzione (ε)

Quantificazione delle proteine

0.750mg/mL

Concentrazione di proteine

In 10 μL7.5μg

A260/A2800.50ratio

Beer-Lambert Projection

Overview

La quantificazione delle proteine mediante assorbanza a 280 nm è un metodo non distruttivo basato sugli aminoacidi aromatici (Trp, Tyr) e sui legami disolfuro presenti nel campione.

💡

Pro Tips

Metodo A280: ideale per proteine purificate con un coefficiente di estinzione noto.
Warburg-Christian: migliore quando si sospetta una contaminazione di acidi nucleici (utilizzando il rapporto A260/A280).
I risultati più accurati si ottengono tra 0,1 e 1,5 unità di assorbanza.
Azzerare sempre lo spettrofotometro con il bianco tampone appropriato.

Fun Facts

"A280 si basa su residui di triptofano e tirosina; le proteine prive di questi non possono essere misurate in questo modo."
"Una proteina pura ha tipicamente un rapporto A260/A280 > 1,8; valori più bassi suggeriscono una contaminazione di DNA/RNA."
"Il metodo non è distruttivo e consente il recupero del campione."

Formula: A280 = ε × c × l (Legge di Beer-Lambert)

Used with this

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Calcola la velocità di lavoro sul campo e la capacità delle attrezzature agricole.

Frequenza allelica

Calcolare le frequenze alleliche e genotipiche all'interno di una popolazione utilizzando il modello di equilibrio di Hardy-Weinberg.

Calcolatore della gestazione dell'alpaca

Stimare la data di creazione (nascita) dei tuoi alpaca e monitorare i progressi della gravidanza.

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Warburg-Christian: migliore quando si sospetta una contaminazione di acidi nucleici (utilizzando il rapporto A260/A280).
I risultati più accurati si ottengono tra 0,1 e 1,5 unità di assorbanza.
Azzerare sempre lo spettrofotometro con il bianco tampone appropriato.

Fun Facts

"A280 si basa su residui di triptofano e tirosina; le proteine prive di questi non possono essere misurate in questo modo."
"Una proteina pura ha tipicamente un rapporto A260/A280 > 1,8; valori più bassi suggeriscono una contaminazione di DNA/RNA."
"Il metodo non è distruttivo e consente il recupero del campione."

Formula: A280 = ε × c × l (Legge di Beer-Lambert)

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