Calcolatore della risospensione

Calcolare il volume di tampone necessario per risospendere una massa o una quantità nota di campione per raggiungere una concentrazione target.

Dettagli del campione

Massa campione

Concentrazione target

Requisiti del buffer

Volume buffer da aggiungere10000.00uL

Buffer Volume vs. Target

How required volume changes with target concentration.

Overview

Questo calcolatore aiuta nella preparazione delle soluzioni determinando la quantità di liquido (tampone o solvente) da aggiungere a una quantità specifica di soluto secco (come DNA, RNA o proteine) per ottenere la concentrazione desiderata. La risospensione è un passaggio fondamentale nei flussi di lavoro della biologia molecolare, in particolare per gli acidi nucleici che arrivano liofilizzati (liofilizzati) dalla sintesi.

💡

Pro Tips

Per le prime, volume (μL) = nmol * 10 per ottenere una concentrazione di 100 µM.
Per gli acidi nucleici, preferire il tampone TE all'acqua per mantenerne l'integrità.
Pipettare delicatamente su e giù o utilizzare il vortex a bassa velocità: una miscelazione vigorosa può tagliare il DNA.
Dopo la risospensione, centrifugare brevemente la provetta per raccogliere eventuali goccioline dal coperchio.

Fun Facts

"La scelta del tampone può influenzare notevolmente la stabilità del DNA: il tampone TE (10 mM Tris-HCl pH 8,0 / 1 mM EDTA) protegge il DNA dalla degradazione meglio della sola acqua."
"L'EDTA nel tampone TE chela gli ioni metallici che attiverebbero le DNasi, mentre Tris mantiene il pH ottimale per prevenire l'idrolisi acida del DNA."
"Questo calcolo presuppone che il volume del soluto sia trascurabile rispetto al volume del tampone, che è valido per piccole masse."
"Una regola pratica per i primer: aggiungendo 10 volte la quantità di nmol in microlitri si ottiene una soluzione madre da 100 µM."

Formula: V_{buffer} = \frac{Mass}{C_{target}}

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