Рассчитайте концентрацию нуклеиновой кислоты по показаниям спектрофотометра A260, используя закон Бера-Ламберта.
Чтение параметров
Концентрация Результат
25.00мкг/мл
Расчетная концентрация
Фактор вымирания50µg/unit
Absorbance0.5AU
Кривая концентрации
Overview
Определение концентрации нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) имеет фундаментальное значение в молекулярной биологии. Это рассчитывается с использованием закона Бера-Ламберта на основе поглощения при 260 нм. Стандартные коэффициенты представляют собой концентрацию, необходимую для получения A260, равного 1,0, с длиной оптического пути 1 см.
💡
Pro Tips
Коэффициент пересчета дцДНК: 50 мкг/мл на 1,0 единицы А260.
Коэффициент пересчета оцДНК: 33 мкг/мл на 1,0 единицы А260.
Коэффициент пересчета РНК: 40 мкг/мл на 1,0 единицы А260.
Соотношение A260/A280 ~1,8 обычно считается «чистым» для ДНК, а ~2,0 — чистым для РНК.
Также проверьте соотношение A260/A230; значения ниже 1,5 могут указывать на загрязнение углеводами или фенолом.
!
Fun Facts
"Нуклеиновые кислоты поглощают УФ-свет с длиной волны 260 нм благодаря резонансной структуре их азотистых оснований (А, Т, С, G)."
"Фридрих Мишер впервые выделил ДНК в 1869 году, назвав ее «нуклеином»."
"Спектрофотометры малого объема NanoDrop используют поверхностное натяжение для удержания капли образца объемом 1–2 мкл между двумя оптическими подставками."
"Закон Бера-Ламберта предполагает линейную зависимость, которая часто нарушается при очень высоком поглощении (>2,0 AU)."
